Ultrazvukový homogenizátor

Nejčastější dotazy o porušených buňkách http://www.scientzbio.com/

Jaké jsou podmínky pro sonikaci Streptomyces (aktinomycety)?

Analytické: aktinomycety patří k molárnímu procentu (mol.%) Gram-pozitivní (Eubacteria) rozvětvené skupiny na phylogenetickém stromu prokaryotického systému, který má molekulární a biologické vlastnosti jedinečné pro prokaryoty. Nicméně ve svých různých skupinách se chemické složení buněčné stěny velmi liší.

U ultrazvuku E. coli se používá 400 W a způsob lámání 5 s po dobu 5 s je účinný, ale používá se na přípravku Streptomyces a nemá žádný účinek kvůli rozdílu v složení buněčné stěny. Pre-spinning léčba Streptomyces (aktinomycetes) je obecně konfigurována k určité koncentraci bakteriální suspenze. Zvláštní podmínky pro drcení pomocí ultrazvukových buněčných disruptorů: shromažďování bakterií v 24 hodinovém kultivačním roztoku při 5 000 r / min po dobu 5 minut za účelem shromažďování buněk; promyje se pufrem pH 7,5 Na2HPO-NaH2PO 3 krát a potom se buňky formují do 1: 3 bakteriální suspenze za použití pufru. Umístěte do 40 ml velké plastové zkumavky; umístěte velkou plastovou zkumavku do ledové lázně a rozdrtíte ji pomocí ultrazvukové sondy (výkon 200W, sonda 1/2 ", rozdrcení 30s, přerušované 30s), rozmělňovací roztok při 12 000 r / min Centrifugujte vysokou rychlostí po dobu 30 min, shromážděte buněčné úlomky a supernatant.Tyto promývací buňky mohou být promyty jednou s předchladeným fyziologickým roztokem nebo Tris-HCl při pH 8. Kromě toho se ultrazvuková dávka velmi liší množstvím vzorku a bakterií.Výkon může být 400- 600w, rozdrcený po dobu 5 s, zastaveno po dobu 5 s, ledová lázeň a konečná koncentrace 1 mM PMSF. K určení příslušné intenzity a frekvence ultrazvuku je nutné zkontrolovat, zda jsou bakterie zcela narušeny kdykoli.